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双荧光素酶报告基因检测试剂盒
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报告基因检测是现代分子生物学研究领域中分析结构基因旁侧区域潜在的顺式元件(如启动子、增强子和沉默子等)和反式作用因子相互作用关系的一种重要工具。吉满生物生产的双荧光素酶报告基因检测试剂盒(Dual Luciferase Reporter Gene Aassy Kit),是一种结合萤火虫和海肾荧光素酶检测的先进辅助报告基因技术。

虽然萤火虫和海肾荧光素酶都具有生物发光报告基因的检测特点,但它们却具有完全不同的进化起源,因而它们的酶结构和底物要求完全不同。我们利用这一特点,将它们配合起来使用,即可形成十分有效的双荧光素酶报告基因系统,其中Renilla Luciferase通常作为内对照。

它的实验原理是先以萤火虫荧光素(firefly luciferin,以下简称荧光素)为底物来检测细胞中的萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,以下简称荧光素酶)。荧光素酶在ATP,Mg2+和O2参与下催化荧光素,生成氧化荧光素(oxyluciferin),荧光素在被氧化过程中,产生生物发光(Bioluminescence)。然后在后续实验中抑制该反应,来终止萤火虫荧光素的生物发光,同时加入海肾荧光素酶(Renilla Luciferase)的底物腔肠素(coelenterazine)。在O2参与下,腔肠素被海肾荧光素酶催化氧化成氧化荧光素(coelenteramide)产生生物发光。然后通过化学发光仪或液闪测定仪测定生物发光。


双萤光素酶报告基因检测系统在单萤光素酶报告基因的基础上引入了“内参对照”报告基因,这样可以在最大程度上减小细胞数目、细胞生长状态和转染效率等外在因素对于实验的影响,使得实验结果更为可信。


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产品货号产品名称产品规格
GM-040502A双萤光素酶报告基因检测试剂盒100次


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产品名称产品名称产品名称H_GDF15 Reporter 293 Cell Line
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HHXXXXXX01
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细胞培养、冻存、复苏试剂准备
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板块名称六
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生长分化因子15 (GDF15)是转化生长因子(TGF)-b家族的远端成员,是一种以25 kDa二聚体形式循环的分泌蛋白。它是一种属于转化生长因子β超家族的蛋白质。在正常情况下,GDF-15在大多数器官中低表达,肝、肾、心和肺等器官损伤时表达上调。

神经胶质细胞系衍生的神经营养因子(glial-cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)家族的GFRAL为GDF15的唯一受体。 GDF15以高亲和力结合GFRAL,但不与GDNF受体家族的其他成员结合,而GFRAL也仅结合GDF15而不结合任何其他GDNF相关配体。GFRAL在结合GDF15后与辅助受体RET结合形成复合物,能够观察到GDNF家族典型的细胞信号,并与RET、AKT、ERK和PLC-γ1的磷酸化相关。

吉满生物H_GDF15 Reporter 293 Cell Line报告基因细胞系,是基于RET-ERK信号通路构建的一种Luciferase报告基因细胞系。当GDF15与其受体GFRAL结合后继续与辅助受体RET结合形成复合物,使RET磷酸化。进一步使ERK磷酸化,激活ELK1。ELK1入核激活荧光素酶(Luciferase)的表达。Luciferase读值即代表信号通路的激活效果,因此可用于GDF15相关药物的体外效果评价。
数据展示
小标题小标题分类一
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小标题小标题分类二
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小标题小标题分类三
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小标题小标题分类四
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细胞培养、冻存、复苏试剂准备
生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P.S+1.5 μg/mL Blasticidin+400 μg/mL G418+125 μg/mL Hygromycin+0.75 μg/mL Puromycin
细胞冻存液:90% FBS+10% DMSO
Assay Buffer:DMEM+1% FBS+1% P.S
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生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P.S+1.5 μg/mL Blasticidin+400 μg/mL G418+125 μg/mL Hygromycin+0.75 μg/mL Puromycin 内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容 细胞冻存液:90% FBS+10% DMSO Assay Buffer:DMEM+1% FBS+1% P.S
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报告基因检测是现代分子生物学研究领域中分析结构基因旁侧区域潜在的顺式元件(如启动子、增强子和沉默子等)和反式作用因子相互作用关系的一种重要工具。吉满生物生产的双荧光素酶报告基因检测试剂盒(Dual Luciferase Reporter Gene Aassy Kit),是一种结合萤火虫和海肾荧光素酶检测的先进辅助报告基因技术。

虽然萤火虫和海肾荧光素酶都具有生物发光报告基因的检测特点,但它们却具有完全不同的进化起源,因而它们的酶结构和底物要求完全不同。我们利用这一特点,将它们配合起来使用,即可形成十分有效的双荧光素酶报告基因系统,其中Renilla Luciferase通常作为内对照。

它的实验原理是先以萤火虫荧光素(firefly luciferin,以下简称荧光素)为底物来检测细胞中的萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,以下简称荧光素酶)。荧光素酶在ATP,Mg2+和O2参与下催化荧光素,生成氧化荧光素(oxyluciferin),荧光素在被氧化过程中,产生生物发光(Bioluminescence)。然后在后续实验中抑制该反应,来终止萤火虫荧光素的生物发光,同时加入海肾荧光素酶(Renilla Luciferase)的底物腔肠素(coelenterazine)。在O2参与下,腔肠素被海肾荧光素酶催化氧化成氧化荧光素(coelenteramide)产生生物发光。然后通过化学发光仪或液闪测定仪测定生物发光。


双萤光素酶报告基因检测系统在单萤光素酶报告基因的基础上引入了“内参对照”报告基因,这样可以在最大程度上减小细胞数目、细胞生长状态和转染效率等外在因素对于实验的影响,使得实验结果更为可信。


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生长分化因子15 (GDF15)是转化生长因子(TGF)-b家族的远端成员,是一种以25 kDa二聚体形式循环的分泌蛋白。它是一种属于转化生长因子β超家族的蛋白质。在正常情况下,GDF-15在大多数器官中低表达,肝、肾、心和肺等器官损伤时表达上调。

神经胶质细胞系衍生的神经营养因子(glial-cell line-derived neurotrophic factor,GDNF)家族的GFRAL为GDF15的唯一受体。 GDF15以高亲和力结合GFRAL,但不与GDNF受体家族的其他成员结合,而GFRAL也仅结合GDF15而不结合任何其他GDNF相关配体。GFRAL在结合GDF15后与辅助受体RET结合形成复合物,能够观察到GDNF家族典型的细胞信号,并与RET、AKT、ERK和PLC-γ1的磷酸化相关。

吉满生物H_GDF15 Reporter 293 Cell Line报告基因细胞系,是基于RET-ERK信号通路构建的一种Luciferase报告基因细胞系。当GDF15与其受体GFRAL结合后继续与辅助受体RET结合形成复合物,使RET磷酸化。进一步使ERK磷酸化,激活ELK1。ELK1入核激活荧光素酶(Luciferase)的表达。Luciferase读值即代表信号通路的激活效果,因此可用于GDF15相关药物的体外效果评价。
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小标题小标题分类二
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小标题小标题分类四
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细胞培养、冻存、复苏试剂准备
生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P.S+1.5 μg/mL Blasticidin+400 μg/mL G418+125 μg/mL Hygromycin+0.75 μg/mL Puromycin
细胞冻存液:90% FBS+10% DMSO
Assay Buffer:DMEM+1% FBS+1% P.S
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生长培养基:DMEM+10% FBS+1% P.S+1.5 μg/mL Blasticidin+400 μg/mL G418+125 μg/mL Hygromycin+0.75 μg/mL Puromycin 内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容板块内容内容 细胞冻存液:90% FBS+10% DMSO Assay Buffer:DMEM+1% FBS+1% P.S
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