SV40(simian virus 40)是从猿猴肾细胞病毒中分离出来的,SV40病毒的细胞转化特性主要与早期蛋白T抗原有关。SV40病毒基因组早期基因编码两种肿瘤抗原(tumor antigen,T抗原),其分子量分别为94000(大T抗原)和17000(小T抗原).T抗原的作用是:①大T抗原为细胞转化的启动所必需;②转化细胞表型的维持必需要有大T抗原的连续表达;③小T抗原对于细胞的转化不是必需的,但可起加强作用。因此,SV40T大抗原能使细胞进入永生化的增殖状态,是常用且有效的体外细胞转化因素之一,已广泛应用于各种人类细胞类型的永生化。
衰老是体外培养的哺乳动物细胞的一般特征,我们体内所有的正常细胞都配备一种自动的自我摧毁机制:在经过大约60次分裂之后,它们都会死亡。而细胞永生化是指体外培养的细胞经过自发的或受外界因素的影响从增殖衰老危机中逃离,从而具有无限增殖能力的过程。目前,使用最广泛的将正常细胞永生化的方法是:通过将SV40大T抗原片段整合入靶细胞的细胞核内,使其表达来构建永生化细胞系。
pGMLV-CMV-SV40T-GFP-puro Lentivirus携带 GFP绿色荧光蛋白,可用于转染效率的直观检测。